Proteine Ricombinanti
Molte proteine che possono essere usate per trattamenti medici sono normalmente espresse in concentrazioni basse. Attraverso la tecnologia del DNA ricombinante, una grande quantità di proteine può essere prodotta. Ciò coinvolge il clonaggio del gene che codifica per la proteina, in un vettore di espressione,che deve contenere un promotore per far sì che la proteina venga espressa.
Molte proteine che possono essere usate per trattamenti medici sono normalmente espresse in concentrazioni basse. Attraverso la tecnologia del DNA ricombinante, una grande quantità di proteine può essere prodotta. Ciò coinvolge il clonaggio del gene che codifica per la proteina, in un vettore di espressione,che deve contenere un promotore per far sì che la proteina venga espressa.
Esempio. Il vettore di espressione contiene il promotore lac e il suo gene adiacente, lacZ, codifica per una β-galattosidasi. Il lattosio o il suo analogo, IPTG, può stimolare l'espressione di questo gene. Se il lacZ è rimpiazzato dal gene codificante la proteina d'interesse, il lattosio o l'IPTG continueranno a stimolare l'espressione delle proteine desiderate. Questo meccanismo è anche un controllo perché se non è presente lo stimolante la proteina non viene espressa.
Il controllo dell'espressione aiuta ad evitare la morte del batterio nel caso che la proteina prodotta sia tossica per esso. Se la proteina prodotta è tossica le cellule muoiono e non ottengo il risltato desiderato; se non si aggiunge l'IPTG non si ha la produzione della cellula ma si ha il clonaggio del vettore; quando la coltura batterica è al massimo dell'espansione e il terreno liquido è divntato opaco si può inserire l'IPTG; per cui i batteri iniziano a produrre le proteine desideraite in grandi quantità.
Le proteine del mammifero possono essere prodotte in forma solubile dal batterio, oppure in corpi solidi di inclusione. In questo caso si devono trovare altri sistemi su cui fare il clonaggio del vettore e l'espressione della proteina.
