Che cos’è una reazione a cetena della polimerasi Il suo nome originale è Polymerase Chain Reaction, abbreviata in PCR. Consiste in una metodica di Biologia Molecolare che permette l’amplificazione di una regione specifica di DNA mediante cicli ripetuti di replicazione a temperature differenti. La PCR è stata messa a punto negli anni ’80 da Mullis […]
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La metodica classica di estrazione del DNA da campioni biologici è l’estrazione fenolica. Come avviene l’estrazione di acidi nucleici Si deve preventivamente ottenere la lisi cellulare del campione mediante frantumazione manuale oppure tramite trattamento con il freddo; si utilizzano solventi chimici (SDS, Urea, Mercaptoetanolo, Proteinasi K) al fine di degradare lipidi e proteine. Dopo alcuni […]
il Dna plasmidico può essere separato ed analizzato tramite diverse tecniche che riporto di seguito. una di queste è una tecnica di separazione basata sul movimento di molecole cariche in un campo elettrico. Sotto l’azione di un campo elettrico particelle cariche migrano verso l’elettrodo di segno opposto. Forze che concorrono alla migrazione: forza di spinta e […]
Crescita della coltura batterica, Preparare il liquido LB medium. Luria-Bertani Medium è un ricco brodo per la crescita di E. coli costituito da : • Triptone 10g, • Estratto di lievito 5g, • NaCl 10 g. Addizionare a 950 ml di H2O deionizzata. Al brodo liquido si aggiunge per ogni litro, 15 g di Agar per […]