Archivio Tag: dna

Reazione a Catena della Polimerasi

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Che cos’è una reazione a cetena della polimerasi Il suo nome originale è  Polymerase  Chain  Reaction, abbreviata in PCR. Consiste in  una  metodica  di  Biologia  Molecolare  che  permette l’amplificazione di una regione specifica di DNA mediante cicli ripetuti di replicazione a temperature differenti. La PCR è stata messa a punto negli anni ’80 da Mullis […]

Estrazione di Acidi Nucleici

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La  metodica classica di  estrazione del  DNA da campioni  biologici è l’estrazione fenolica. Come avviene l’estrazione di acidi nucleici Si  deve preventivamente ottenere la lisi cellulare  del  campione  mediante  frantumazione  manuale  oppure tramite trattamento  con  il  freddo; si  utilizzano  solventi  chimici  (SDS,  Urea,  Mercaptoetanolo, Proteinasi K) al fine di degradare lipidi e proteine. Dopo alcuni […]

Elettroforesi Dna Plasmidico

il Dna plasmidico può essere separato ed analizzato tramite diverse tecniche che riporto di seguito. una di queste è una tecnica di separazione basata sul movimento di molecole cariche in un campo elettrico. Sotto l’azione di un campo elettrico particelle cariche migrano verso l’elettrodo di segno opposto. Forze che concorrono alla migrazione: forza di spinta e […]

Dna Plasmidico

Crescita della coltura batterica, Preparare  il liquido LB medium. Luria-Bertani Medium è un ricco brodo per la crescita di E. coli  costituito da : • Triptone 10g, • Estratto di lievito 5g, • NaCl 10 g. Addizionare a 950 ml di H2O deionizzata. Al brodo liquido si aggiunge per ogni litro, 15 g di Agar per […]