Questo metodo si basa sulla marcatura terminale al 5’ o al 3’ del DNA a doppio filamento (con 32P), seguita dalla denaturazione e separazione dei due filamenti.
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Il sequenziamento del DNA consiste in una reazione di PCR modificata in cui viene inserito un reagente in più, cioè una miscela di 4 terminatori marcati con quattro diversi fluorocromi e il cui template è rappresentato dal prodotto di PCR purificato. Un terminatore è un – dideossi -nucleotide (ddNTP), cioè un nucleotide con un atomo […]