Allele: In genetica, forma alternativa di un gene, responsabile della particolare modalità con cui si manifesta il carattere ereditario controllato da quel gene. Ad esempio, il gene che controlla il carattere “colore degli occhi” esiste in due forme, o alleli, alternative: l’allele “occhio chiaro” e l’allele “occhio scuro”.
Archivio Categoria: Biologia Molecolare e Genetica
La genetica e la biologia molecolare sono due branchie della biologia che indagano i meccanismi che regolano la vita a livello molecolare e di informazione genetica.
la biologia molecolare indaga principalmente quei processi molecolari (es.:replicazione, trascrizione, traduzione) del materiale genetico, mentre con il termine genetica si indica lo studio dell’ereditarietà dei caratteri (es.:DNA, RNA, geni).
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Ago
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I batteriofagi sono virus in grado di infettare I batteri; si utilizzano quando il frammento di DNA da clonare è troppo grande per utilizzare vettori plasmidici ( librerie di DNA).
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Viene definito operone l’insieme di geni regolati in modo coordinato. L’organizzazione dei geni in operoni è un elemento di fondamentale importanza per la regolazione genica dei procarioti: gli operoni contengono, oltre ai geni che devono essere trascritti, sequenze siti di controllo, che attraverso diversi meccanismi regolano l’espressione dei geni dell’intero operone.
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La sintesi del filamento ritardato richiede un corto primer che verrà rimosso; alla fine del cromosoma non c’è modo di sintetizzare questa regione quando è rimosso l’ultimo primer. Pertanto il filamento ritardato è sempre più corto rispetto al suo modello di almeno la lunghezza del primer. Questo è il cosiddetto “problema di fine replicazione”.
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La Biosintesi degli Acidi Grassi è l’assemblaggio di unità di acetilCoA (precisamente di malonil-CoA) fino a formare il palmitato (C16 saturo). Suddivisibile in tre fasi : 1. Attivazione 2. Allungamento 3. Termine
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Le strategie di base per il clonaggio consistono in tre tappe: Scelta del DNA da usare per il clonaggio (DNA cromosomico o cDNA, complementare al m-RNA, che non presenta la sequenza intronica). Frammentazione del DNA con enzimi di restrizione, creando una libreria genica o genoteca (che può essere genomica o a cDNA). Screening della libreria […]
I metodi di trasformazione delle cellule ospiti sono distinti in metodi fisici, come lo shock termico, l'elettroporazione e la microiniezione; metodi chimici come la trasformazione con CaCl2e il metodo di Hanahan; o metodi biologici come la lipofezione.
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Per inserire il frammento di DNA all'interno di un vettore plasmidico si sfruttano alcuni enzimi chiamati endonucleasi di restrizione; questi enzimi tagliano il legame fosfodiestere all'interno del DNA, in sequenze specifiche chiamate siti di restrizione. Le endonucleasi I tagliano in un sito casuale utilizzando ATP; le endonucleasi IIdanno frammenti specifici ed hanno funzione di metilasi, […]
20
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Il m-RNA è solo una piccola frazione degli RNA presenti nella cellula; la maggior parte degli RNA è costituita da r-RNA. Una tecnica specifica per isolarlo utilizza la sua coda di Poli-A: si possono creare specifiche resine per isolarlo attraverso una cromatografia di affinità.
20
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Superato il sito del Poli-A, la RNA polimerasi II continua la trascrizione arrivando ad un sito chiamato CoTC che, trascritto, forma un'ansa sul m-RNA e richiama la proteina Xrn2 con attività esonucleasica. Questa proteina degrada il m-RNA attaccato alla polimerasi, quando la proteina raggiunge la polimerasi la fa dissociare dal DNA.