Archivio Autore: Marco

Purificazione delle Proteine

Nei primi passaggi di purificazione delle proteine è spesso utile impiegare tecniche non cromatografiche di frazionamento selettivo, ad alta capacità. Frazionamento con sali. Si basa sulla precipitazione delle proteine per ‘salting out’. I sali ad alte concentrazioni tendono a diminuire la solubilità proteica attraverso meccanismi piuttosto complessi. Si sa che gli ioni (anioni e cationi) liberati […]

Estrazione di Proteine

La localizzazione delle proteine da purificare influenza le metodiche che possono essere impiegate per ottenere un estratto grezzo di partenza. Per le proteine solubili extracellulari, cioè secrete in fluidi extracellulari (brodo di coltura nel caso di microrganismi; oppure fluidi biologici quali sangue, latte, urina etc.) in genere basta concentrare il liquido, perché la quantità di proteine […]

Elettroforesi Dna Plasmidico

il Dna plasmidico può essere separato ed analizzato tramite diverse tecniche che riporto di seguito. una di queste è una tecnica di separazione basata sul movimento di molecole cariche in un campo elettrico. Sotto l’azione di un campo elettrico particelle cariche migrano verso l’elettrodo di segno opposto. Forze che concorrono alla migrazione: forza di spinta e […]

Dna Plasmidico

Crescita della coltura batterica, Preparare  il liquido LB medium. Luria-Bertani Medium è un ricco brodo per la crescita di E. coli  costituito da : • Triptone 10g, • Estratto di lievito 5g, • NaCl 10 g. Addizionare a 950 ml di H2O deionizzata. Al brodo liquido si aggiunge per ogni litro, 15 g di Agar per […]

Interferenza della Luce

L’interferenza è un fenomeno tipicamente ondulatorio, adeguatamente conosciuto nel 1600 – ‘700 per quanto riguarda le onde meccaniche (sonore in particolare). La natura della luce ormai svelata? Nella prima metà del secolo XIX si poteva dire di aver ormai definito la natura della luce e di aver spiegato ompletamente tutti i fenomeni luminosi. Un quadro sintetico delle […]

Teoria Corpuscolare della Luce

Formulata da Isaac Newton nel XVII secolo. La luce viene vista come composta da piccole particelle di materia (corpuscoli) emesse in tutte le direzioni. Oltre che essere matematicamente molto semplice (molto più della teoria ondulatoria) questa teoria spiega molto facilmente alcune caratteristiche della propagazione della luce che erano ben note all’epoca di Newton.  Anche il […]

Cromatografia

Sviluppo della colonna significa un processo attraverso il quale i campioni vengono separati Gli eluati: • Man mano che il campione (eluato) fuoriesce, questo  viene raccolto e analizzato, • Oppure si raccolgono tutti gli eluati e si analizzano dopo, Collettore di frazioni: • Ha lo scopo di raccogliere un volume ben preciso degli eluati, Rivelatore: •  Gli […]

Cromatografia su Strato Sottile

cromatografia

Per effettuare separazioni di miscele con questa metodica si sfruttano i principi di: cromatografia di adsorbimento, cromatografia di ripartizione, gel filtrazione, scambio ionico. Cromatografia: fase stazionaria La fase stazionaria é supportata su lastre di vetro, fogli di alluminio o di plastica resistente ai solventi usati per l’eluizione. Fra i materiali più usati comunemente come fase […]