Non è ancora chiaro come avviene la terminazione della trascrizione negli eucarioti e le sequenze di stop non sono ben definite. I fattori che servono per marcare la poliadenilazione, CPSF CstF, viaggiano sul dominio carbossiterminale della polimerasi. Ad un certo punto la polimerasi trascrive sequenze AAUAAA, a distanza di 10-30 nucleotidi da essa si trova […]
Archivio Categoria: Biologia Molecolare e Genetica
La genetica e la biologia molecolare sono due branchie della biologia che indagano i meccanismi che regolano la vita a livello molecolare e di informazione genetica.
la biologia molecolare indaga principalmente quei processi molecolari (es.:replicazione, trascrizione, traduzione) del materiale genetico, mentre con il termine genetica si indica lo studio dell’ereditarietà dei caratteri (es.:DNA, RNA, geni).
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Nov
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L’aggiunta del CAP è un evento estremamente complesso ed importante. L’estremità 5′ del trascritto nascente termina con un trifosfato; interviene una fosfatasi che rimuove il fosfato in γ (gamma), poi interviene una guanosintransferasi e, con la partecipazione di un GTP, si ha la rimozione di un pirofosfato con la formazione di un legame a ponte […]
20
Nov
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I fattori trascrizionali possono agire in modi diversi in base al tipo di regolazione:
20
Nov
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Negli eucarioti c’è una significativa differenza tra geni che codificano per proteine e geni che codificano per RNA. L’elemento promotore più comune nei geni proteici eucariotici è la TATAbox, localizzata tra le posizioni -35 e -20. La sua sequenza consenso TATAAA è molto simile alla regione -10 del sito di aggancio del fattore σ70 procariotico. […]
Mappaggio dei geni in una specifica localizzazione del cromosoma. Questo è un passaggio critico per capire importanti malattie genetiche. Si può fare attraverso due tecniche: usando l’analisi di legame, per individuare la posizione relativa tra due geni in un cromosoma; oppure usando la mappatura fisica, utilizzando tutte le tecniche disponibili per individuare la disposizione assoluta […]
20
Nov
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Le polimerasi, proteine con funzione enzimatica, catalizzano la sintesi del polimero dalla catena, aggiungendo nucleotidi trifosfato: sia la RNA che la DNA polimerasi possono aggiungere nucleotidi a un filamento esistente anche se con una differenza, la DNA polimerasi non può iniziare una nuova catena ma ha bisogno di un altro enzima che sintetizzi un oligonucleotide […]
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Ago
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Le cellule batteriche vengono mescolate con il DNA ricombinante plasmidico; il mix ottenuto viene posto in cuvette munite di elettrodi connessi ad un alimentatore; si induce un breve impulso elettrico che apre transitoriamente dei pori nella membrana cellulare attraverso i quali entra il plasmide.
13
Ago
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Il DNA può essere incorporato entro vescicole lipidiche artificiali dette liposomi.In questo caso le cariche del DNA sono schermate e la vescicola lipidica, fondendosi con la membrana batterica, permette l'ingresso del DNA nella cellula. È stato sviluppato un certo numero di metodi allo scopo di incapsulare il DNA in doppi strati lipidici sintetici che assomigliano […]
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Ago
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Un cosmide è un plasmide di circa 5kB, contenente un sito COS; permette di inserire fino a 45kB di DNA e possiede un'origine di replicazione e un gene per la farmacoresistenza. Questo vettore è la combinazione di un vettore plasmidico e il sito COS che permette l'ingresso del DNA bersaglio nella testa del fago λ. […]
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Ago
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Possono accettare inserti grandi fino a 2Mb! componenti essenziali di un vettore YAC sono: un centromero di lievito (CEN); una sequenza di replicazione autonoma (ARS); due set di sequenze telomeriche di lievito (TEL); marcatori di resistenza per stabilire una selezione positiva in E.Coli; un sito ORI; siti di restrizione unici; marcatori di selezione auxotrofica (ura3, […]