Archivio Tag: laboratorio

Clone

Un clone è l’ insieme di cellule geneticamente identiche o organismi, provenienti da una singola cellula o organismo da riproduzione asessuale per divisione fasi embrionali iniziali artificiali o trasferimento nucleare artificiale. Un insieme di repliche di un frammento di DNA ricombinante ottenuto mediante tecniche di ingegneria genetica. Esempi di cloni naturali sono batteri della stessa […]

Esame di Laboratorio

procedimento qualitativo, semi-quantitativo o quantitativo che serve: ‹ ad evidenziare la presenza, o a misurare la quantità, di un costituente biochimico in un materiale biologico. ‹ a misurare le proprietà di alcuni costituenti biologici, ‹ a riscontrare cellule o altri elementi. • Tutti gli esami di laboratorio hanno in comune : a) il materiale esaminato, […]

Sicurezza in Laboratorio

Una buona manualità e una strumentazione corretta sono elementi essenziali per maneggiare con sicurezza materiali pericolosi e per la buona riuscita degli esperimenti. Queste conoscenze e abilità, che costituiscono la parte fondamentale  di un corso di laboratorio, sono caratteristiche talmente importanti e apprezzate da essere talvolta definite come “l’arte della sintesi chimica”. Il primo a […]

Screening del Tumore al Colon-Retto

Soggetti a rischio generico: l’incidenza di cancro colon-rettale è molto bassa per soggetti di età inferiore ai 50 anni. Oltre questa età, invece, il rischio aumenta progressivamente in entrambi i sessi. I soggetti di età uguale o superiore a 50 anni, privi di sintomi o specifici fattori di rischio, sono definiti soggetti a rischio generico. […]

Sequenziamento

Il sequenziamento  del  DNA consiste  in  una  reazione  di  PCR  modificata  in  cui  viene  inserito  un reagente  in  più,  cioè  una  miscela  di  4  terminatori  marcati  con  quattro  diversi  fluorocromi  e  il  cui template è rappresentato dal prodotto di PCR purificato. Un terminatore è un – dideossi -nucleotide (ddNTP), cioè un nucleotide con un atomo […]

Estrazione di Acidi Nucleici

estr_acidi-nucleici

La  metodica classica di  estrazione del  DNA da campioni  biologici è l’estrazione fenolica. Come avviene l’estrazione di acidi nucleici Si  deve preventivamente ottenere la lisi cellulare  del  campione  mediante  frantumazione  manuale  oppure tramite trattamento  con  il  freddo; si  utilizzano  solventi  chimici  (SDS,  Urea,  Mercaptoetanolo, Proteinasi K) al fine di degradare lipidi e proteine. Dopo alcuni […]

Interferenza della Luce

L’interferenza è un fenomeno tipicamente ondulatorio, adeguatamente conosciuto nel 1600 – ‘700 per quanto riguarda le onde meccaniche (sonore in particolare). La natura della luce ormai svelata? Nella prima metà del secolo XIX si poteva dire di aver ormai definito la natura della luce e di aver spiegato ompletamente tutti i fenomeni luminosi. Un quadro sintetico delle […]

Trasferimento Acidi Nucleici

È il trasferimento e immobilizzazione di un campione di acidi nucleici su un supporto solido (in genere nitrocellulosa o nylon). Southern blotting: Il gel di agarosio contenente il DNA da trasferire viene posto su un ponte di carta da filtro, le cui estremità pescano all’interno di un recipiente contenente il tampone di trasferimento. La membrana viene posta in contatto con […]

Blotting

esistono diverse tipologie di blotting: Western Blotting: Le proteine separate in elettroforesi (SDS-PAGE)  possono essere trasferite su un foglio di nitrocellulosa. Il trasferimento, di solito, si effettua per elettroblotting: il gel e la nitrocellulosa vengono posti in un apposito supporto a forma di sandwich immerso in un tampone nel quale ci sono due elettrodi paralleli. La corrente […]

Gel di Poliacrilammide

I gel di acrilammide sono preparati facendo polimerizzare monomeri di acrilammide in presenza di piccole quantità di N,N’-metilenbisacrilammide. La polimerizzazione inizia con l’aggiunta di ammonio persolfato (APS) e TEMED. Il TEMED catalizza la decomposizione dello ione persolfato: si producono radicali liberi che attaccano i monomeri di acrilammide e ne avviano la polimerizzazione. I gel denaturanti contengono, inoltre, anche SDS, […]